【关键词】 乙型肝炎病毒;乙肝病毒血清标志物;荧光定量PCR法
慢性乙肝患者和病毒携带者是乙肝的主要传染源,传染性大小与病毒复制指标(HBeAg、HBVDNA)是否阳性有关。仅作血清标志物检测难于对病毒复制状态作出全面判断,而血清标志物与HBVDNA联合检测有利于对乙肝患者的诊断和治疗提供客观依据[1]。本文对536例孕妇患者HBV血清标志物的不同模式与HBVDNA定量检测结果进行对比分析,报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2008年6至11月本院门诊定期检查澳抗阳性孕妇(26~36周)的536例血清标本。
1.2 方法
1.2.1 HBV血清免疫学标志物的测定:采用ELISA方法,试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供,操作及结果判断均按说明书。使用奥地利的安图2010型酶标仪检测OD值,结果以阴性或阳性报告。室内指控物由卫生部临床检验中心提供。
1.2.2 HBVDNA定量检测:采用PCR荧光探针法,仪器为NJ4800荧光定量PCR仪。试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供,以拷贝数表示DNA含量,结果判定:①对于500≤测定拷贝数<108拷贝/ml的样本,报告相应的测定结果,定量结果以>5.00×102copies/ml为判定阳性的标准。②对于测定拷贝数<500拷贝/ml的样本,所测结果仅供参考,报告上注明<500拷贝/ml或低于试剂盒检测下线。室内指控物由卫生部临床检验中心提供。
1.3 统计学分析
应用SPSS 13.0统计软件,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血清标志物的不同模式与HBVDNA定量检测结果
536例孕妇血清标本经ELISA检测后分为4个组合模式,各种模式HBVDNA阳性检测结果见表1。表1 536例孕妇血清标志物的不同模式与HBVDNA检测结果(略)
2.2 HBVDNA与HBeAg关系
在HBeAg(+)的217例中有210例检出HBVDNA阳性,检出率为96.8%,在HBeAg(-)的319例有63例检出HBVDNA阳性,检出率为19.7%。HBeAg(+)的1和2组HBVDNA阳性检出率明显高于HBeAg(-)的其他2组,差异有统计学意义(P<0.05),而1组和2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论
3.1 HBeAg是HBV活动性复制和有传染性的重要标记
它与HBVDNA和DNAP密切相关,从表中分析表明,HBeAg(+)的2组HBVDNA定量结果及阳性率均高于HBeAg(-)的2组,表明血清中HBeAg与HBVDNA含量成线性正相关[2]。
3.2 HBVDNA的检测是乙肝感染的辅助诊断和乙肝患者药物治疗疗效的监控指标
HBVDNA是HBV感染最直接、特异和灵敏的指标,与HBeAg几乎同时出现在血液中。在HBeAg(+)患者中,绝大多数 HBVDNA呈定量阳性,说明病毒复制活跃,传染性很强。在HBeAg(-)患者中,HBVDNA绝大多数为阴性,传染性较小,HBVDNA复制处于低水平,HBVDNA可能已与宿主DNA整合长期潜伏下来。但有一少部分患者由于HBVDNA前C区基因发生突变,HBeAg不能表达, HBVDNA在血清中仍高水平表达,维持阳性,HBV仍在活动性复制 ,传染性强[3]。因此,不能仅凭HBeAg转阴出现抗HBe就认为是好转或治疗有效。由于环状双股HBVDNA位于核心部位,是病毒复制的主体,所以在评价治疗乙肝与预后判断方面,HBVDNA检测至关重要,尤其是HBeAg()患者。HBVDNA定量检测是动态观察药物疗效的确切指标[4]。
综上所述,乙肝血清标志物的测定是目前临床用于乙肝检测最普及的指标,各实验室均有各自的模式,乙肝血清标志物检测有一定的局限性,单凭标志物模式难以准确判断HBV复制程度及传染性的强弱,HBVDNA是HBV感染最直接、特异和灵敏的指标,定量检测HBVDNA能真实反映其复制情况,对诊断治疗乙肝患者及疗效观察具有较大的指导意义。
【参考文献】
1 张继东.化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附注检测乙肝病毒标志物的比较.中国全科医学,2008,11:1299.
2 李永哲,窦亚玲乙型肝炎病毒DNA定量值与HBeAg、抗HBe的相关性分析.中华流行病学杂志,2006,27:709711.
3 彭文伟主编.传染病学.第5版.北京:人民卫生出版社,2002.1721.
4 陶其敏.如何看待病毒性肝炎的基因诊断.中华检验医学杂志,2002,25:6970.
对此文章有什么疑问,请提交在乙肝论坛